- Ich bin Neukunde und habe noch keine Zugangsdaten für den SeqlabDirectServer - kann also nicht online bestellen. Wie kann ich dennoch SEQLAB beauftragen meine DNA-Proben zu sequenzieren?

Benutzen Sie bei ihrer ersten Bestellung bitte die Bestellscheine von der SEQLAB-Homepage (unter SERVICE/Bestellformulare). Bitte drucken Sie den passenden Bestellschein aus und tragen sie ihre Adressdaten, E-Mail-Adresse, Telefonnummer und die Angaben zu den Proben ein. Legen Sie diesen Schein Ihren Proben bei und schicken Sie alles an SEQLAB GmbH, Postfach 3343, 37083 Göttingen.

Mit Eingang der Proben erhalten Sie von uns zwei E-Mails:

1. Eine Eingangsbestätigung für Ihre Proben

2. Ihre Zugangsdaten zum SeqlabDirectServer bestehend aus Ihrer Kundennummer und einem automatisch generierten Passwort, das von Ihnen nach dem ersten Einloggen in etwas leichter Merkbares verändert werden kann.

Alle weiteren Bestellungen können ab dann online erfolgen.

- Mein Bedarf an Sequenzierungen übersteigt 50 Proben pro Jahr. Ich möchte den Preisvorteil von vorausbezahlten Sequenzierungen nutzen und interessiere mich daher für die Prepaid-Sequenzierungen von SEQLAB. Wie kann ich ein solches Prepaid-Konto einrichten?

Schicken Sie uns eine E-Mail mit Ihrer Bestellung (Anzahl und Art der gewünschten Sequenzierungen - möglich sind 50, 100, 500 oder 1000er Pakete) - oder - rufen Sie uns einfach an! (0551/3700010) Unsere freundlichen Mitarbeiter nehmen Ihre Bestellung gerne entgegen. Als Neukunde benötigen wir Ihre Adressdaten und E-Mail-Adresse am besten in schriftlicher Form, um Übermittlungsfehler zu vermeiden (E-Mail an bio-service@seqlab.de oder Fax an 0551/3700012). Ihr Prepaid-Konto auf dem SeqlabDirectServer wird dann sofort freigeschaltet, Sie bekommen Ihre Zugangsdaten per E-Mail übermittelt. Bei größeren Bestellungen machen wir Ihnen auch gerne ein auf Ihren Bedarf zugeschnittenes Angebot.

- Benötigt man für Prepaid-Sequenzierungen sogenannte Labels (Strichcode-Aufkleber)?

Nein! Unser System kommt völlig ohne Gegenstände aus, die man verlegen oder verlieren kann. Unsere Datenbank wacht akribisch und manipulationssicher über die Ihnen gutgeschriebenen Sequenzierungen. Bei jeder Bestellung wird die entsprechende Anzahl an Sequenzierungen von Ihrem Prepaid-Guthaben abgezogen. Eine Auflistung aller bislang erfolgten Bestellungen ermöglicht Ihnen die volle Kontrolle über Ihr SEQLAB-Direct-Konto.

- Ich merke gerade, daß ich falsche oder falsch pipettierte Proben zu SEQLAB geschickt habe. Bis zu welchem Zeitpunkt kann ich meine Bestellung noch zurücknehmen und wie mache ich das?

Sie können über Ihr SeqlabDirect-Konto die Bestellung stornieren. Benutzen Sie dazu die Schaltfläche "Auftrag stornieren". Dies können Sie tun, solange im Auftragsstatus der Probeneingang noch nicht vermerkt ist.

- In welcher Form schicke ich die Proben?

Auf unserer Homepage (unter DNA/DNA-Sequenzierung) finden Sie zu den einzelnen Sequenzierungsangeboten (HotShot, AdvantageRead/Vollservice) die Texte "Was wir brauchen:" Dort steht jeweils beschrieben, wie Sie die Proben vorbereiten sollten.

Haben Sie weitere Fragen? Rufen Sie uns einfach an! (0551 3700010)

- Kann man Proben, die als HotShot oder extended HotShot sequenziert werden sollen auch in sogenannten 8er-Stripes schicken?

Bitte nicht! Bei den meisten 8er-Stripes ist der Deckel kein fester Bestandteil des Proben-Cups. Da die Beschriftung bei HotShots und extended HotShots auf dem Deckel erfolgen sollte, ist nach Abnahme der Deckel keine sichere Zuordnung der Probe mehr möglich. Dies kann zu Vertauschungen und Verwechslungen führen. Bitte benutzen Sie nur einzelne 0,2ml-Cups mit flachem Deckel, auf dem Sie eine durchlaufende Nummerierung mit einem wischfesten Filzschreiber aufbringen.

- Warum ist meine Sequenz nach einem polyA, PolyT, PolyC oder polyG nur noch schwer lesbar?

Nach solchen Sequenzmotiven kommt es häufig zu sog. Schwebungen, d.h neben dem eigentlichen Haupt-Peak gibt es noch vorschwingende oder nachschwingende Peaks. Ursache dafür ist ein "strand-slippage" genanntes Phänomen. In einem PolyN-Bereich kann der bei der Sequenzierungreaktion neusynthetisierte (Fluoreszenz-markierte) DNA-Strang auf der Template-DNA verrutschen. Schließlich passen z.B. PolyAs immer über PolyTs egal in welcher Position. So kommt es bei z.B. 10 aufeinander folgenden As dazu, daß auch 8, 9 oder 11, 12 Ts in den neuen Strang eingebaut werden.

Verläßt die Polymerase dann den PolyN-Bereich, überlagern sich diese verschiedenen DNA-Stränge mit unterschiedlich langen Poly-Bereichen - die Sequenz wird unleserlich. Je länger ein Poly-Bereich ist, desto schlimmer macht sich dieser Effekt bemerkbar. Bei PCR-Produkten kann dies auch schon bei der PCR passiert sein. Eine saubere Sequenzierung ist dann schon nicht mehr möglich.

Ein möglicher Ausweg ist die Klonierung des PCR-Produkts in einen Vektor und die anschließende Sequenzierungen mehrerer Klone. Statistisch kann dann eine Aussage über die tätsächlich vorliegende Anzahl der Nukleotide im PolyN-Bereich getroffen werden. Fragen Sie SEQLAB, wenn wir Ihr Poly-PCR-Produkt klonieren sollen.

- Das Ergebnis der Sequenzierungen ist nicht gut ausgefallen. Wer hilft mir weiter?

SEQLAB bemüht sich immer, das Maximum aus Ihren Proben herauszuholen. Spezielle Bearbeitungsschritte und Protokolle erlauben i. d. R. lange Leseweiten und saubere Sequenzen.

Dennoch gibt es manchmal Bedingungen, die das Erstellen einer gelungenen Sequenz erschweren oder gar verhindern. Dies können sehr unterschiedliche Gründe sein. Viele Fehlerursachen lassen sich bereits am Elektropherogramm erkennen, für andere benötigt man zusätzliche Informationen.

Falls Sie also zu den Ergebnissen der Sequenzierungen Fragen haben oder deren Interpretation Probleme bereitet oder auch (und gerade dann), wenn Sie mit den Ergebnissen gar nicht zufrieden sind - rufen Sie uns bitte umgehend an (0551 3700010). Unsere erfahrenen Mitarbeiter helfen Ihnen gerne. Probleme lassen sich auf diese Weise schnell klären und eine Verbesserung der Ergebnisse lässt sich mit den richtigen Tipps in den meisten Fällen einfach erreichen.

Damit wir Ihre Sequenzen schnell finden können, ist es hilfreich, wenn Sie die Lieferscheinnummer oder den SEQLAB-Auftragscode angeben können.